Osocze bogate w czynniki wzrostu (PRGF) w niechirurgicznej terapii przyzębia: randomizowane badanie kliniczne

Tłumaczenie oryginalnego artykułu: Saurav Panda, Adrita Purkayastha, Rinkee Mohanty, Rashmita Nayak, Anurag Satpathy, Abhaya Chandra DAS, Manoj Kumar, Gatha Mohanty, Sital Panda, Massimo Del Fabbro, Plasma rich in growth factors (PRGF) in non-surgical periodontal therapy: a randomized clinical trial, Braz Oral Res 2020 Apr 17:34:e034.

Źródło: https://www.scielo.br/j/bor/a/9R6K66PrzWpbTMDC8twnHGK/?lang=en

Streszczenie

Celem tego randomizowanego badania klinicznego z podwójną ślepą próbą i podwójną ślepą próbą była ocena skuteczności klinicznej stosowania osocza bogatego w czynniki wzrostu (PRGF) jako uzupełnienie skalingu i planowania korzeni (SRP) w leczeniu kieszonek przyzębnych. Dwudziestu sześciu pacjentów (15 mężczyzn, 11 kobiet) ze zdiagnozowanym uogólnionym zapaleniem przyzębia z głębokością kieszonek > 5 mm i wskaźnikiem płytki nazębnej < 1,5 zostało losowo przydzielonych przy użyciu sekwencji losowej wygenerowanej komputerowo do dwóch grup, z których jedna była leczona dokieszeniowym podaniem preparatu PRGF jako środka wspomagającego do SRP i inne z samym SRP. Wyniki kliniczne, takie jak głębokość kieszeni (PD), względny poziom przyczepu (RAL) i wskaźnik krwawienia z bruzdy (SBI), oceniano na początku badania, po 3 i 6 miesiącach. Pod koniec 6-miesięcznej obserwacji przeprowadzono analizę dwudziestu dwóch pacjentów (44 ośrodki) przy użyciu oprogramowania SPSS 20.0v. Zaobserwowano istotną statystyczną różnicę pomiędzy obiema grupami faworyzującymi grupę SRP + PRGF pod względem PD (p = 0,007) i RAL (p = 0,021) na koniec 6-miesięcznej obserwacji. Wystąpiła także statystycznie istotna różnica (< 0,001) we wszystkich punktach czasowych w porównaniu z wartością wyjściową, dla wszystkich parametrów w porównaniu wewnątrzgrupowym. Co więcej, miejsca z PD > 4 mm wymagające dalszego leczenia po 6 miesiącach obserwacji były istotnie mniejsze w grupie SRP+PRGF. Stwierdzono, że zastosowanie technologii PRGF w niechirurgicznej terapii przyzębia, poprzez pojedyncze podanie do kieszonki przyzębnej, jako uzupełnienie SRP, u pacjentów z przewlekłym zapaleniem przyzębia, skutecznie zmniejsza głębokość kieszonek i zwiększa poziom przywiązania klinicznego.

płytki krwi; Regeneracja; Gojenie się ran

Wstęp

Choroba przyzębia to zapalne zniszczenie struktur podporowych zębów wywołane przez bakterie chorobotwórcze, prowadzące do utraty przyczepu nabłonkowego.1 Leczenie chorób przyzębia zawsze rozpoczyna się od zmniejszenia kieszonek przyzębnych i eliminacji stanu zapalnego. Podstawowym celem leczenia periodontologicznego jest wyeliminowanie płytki bakteryjnej i kamienia nazębnego oraz umożliwienie gojenia się tkanek przyzębia.2 Prawidłowe oczyszczenie kieszeni przyzębnych z płytki nazębnej i kamienia nazębnego można osiągnąć stosując metody niechirurgiczne, takie jak skaling i planowanie korzeni ( SRP). Po osiągnięciu tego można rozpocząć chirurgiczną część leczenia, jeśli jest to wskazane.3

Niechirurgiczne leczenie przyzębia (NSPT), takie jak SRP, pomaga w poprawie i utrzymaniu zdrowia przyzębia przy podejściu zachowawczym. Różne badania wykazały skuteczność SRP w utrzymaniu zdrowego przyzębia.4,5 Jednakże głębokie kieszonki przyzębne utrudniają skuteczność NSPT z powodu niepełnego oczyszczenia w niedostępnych głębokich obszarach kieszonek.6

Przez lata NSPT było przeprowadzane przez szeroką gamę preparatów wspomagających z SRP w celu skutecznego leczenia i utrzymania zdrowia przyzębia w tak głębokich kieszonkach przyzębnych. Lokalne systemy dostarczania leków, takie jak środki przeciwdrobnoustrojowe, olejki eteryczne, przeciwutleniacze i ekstrakty roślinne, są stosowane jako uzupełnienie SRP w leczeniu kieszonek przyzębnych z różnym powodzeniem.7,8,9,10,11

Polipeptydowe czynniki wzrostu, takie jak płytkopochodny czynnik wzrostu (PDGF), śródbłonkowy czynnik wzrostu naczyń (VEGF), insulinopodobny czynnik wzrostu (IGF) i transformujący czynnik wzrostu (TGF), poprawiały wyniki kliniczne i radiologiczne, szczególnie w chirurgicznym leczeniu przyzębia śródkostnego wady.12,13 Ponieważ wiadomo, że sprzyjają gojeniu się ran i nabłonkowi, mogą również pomóc we wczesnym wyleczeniu przewlekłych zmian zapalnych, takich jak kieszonki przyzębne, a także okazać się korzystne w niechirurgicznym leczeniu przyzębia.7,14

Autologiczne koncentraty płytek krwi (APC) zyskują popularność w wielu scenariuszach klinicznych, ponieważ działają jako rezerwuar szeregu czynników wzrostu, w tym PDGF, VEGF, TGF, IGF itp.15,16,17 Udział płytek krwi w tkankach miękkich i twardych regeneracja tkanek opiera się na różnych czynnikach wzrostu przechowywanych w ziarnistościach alfa i ich uwalnianiu po aktywacji fizjologicznej.

Osocze bogate w czynniki wzrostu (PRGF) to autologiczny koncentrat płytek krwi, który dostarcza szereg polipeptydowych czynników wzrostu, wspomagających regenerację tkanek miękkich i kości.18 Gojenie kieszonki przyzębnej polega na wzmocnieniu przyczepu nabłonka dziąseł do powierzchni korzenia poprzez proliferację komórek i różnicowanie. Czynniki wzrostu uwalniane z PRGF sprzyjają procesom biologicznym, takim jak proliferacja, migracja i różnicowanie na poziomie komórkowym.19 PRGF to system drugiej generacji, podobny do osocza bogatopłytkowego (PRP), stosowany do otrzymywania płytek krwi i białek osocza i ma wyjątkowe zalety ponieważ wymaga mniej krwi żylnej, jest wygodniejszy, mniej czasochłonny, bezpieczny, łatwy w użyciu i powoduje szybsze gojenie.20

Jednakże skutki kliniczne i korzyści stosowania PRGF w gojeniu przyzębia są słabo poznane i dobrze zbadane. Ponadto, według naszej wiedzy, nie zgłoszono dotychczas żadnych badań klinicznych oceniających skuteczność PRGF w NSPT. Dlatego celem tego randomizowanego badania klinicznego było zbadanie skuteczności klinicznej stosowania PRGF jako dodatku do SRP pod względem wzmocnienia poziomu przyczepu i zmniejszenia głębokości kieszonek w leczeniu kieszonek przyzębnych.

Metodologia

Badana populacja
Dwudziestu sześciu pacjentów (15 mężczyzn, 11 kobiet) w wieku 30–50 lat (średni wiek 35,8 + 12,7) cierpiących na uogólnione zapalenie przyzębia w III i stopniu A lub B bez czynnika ryzyka i obecnie niestabilne przyzębie statusu (PPD>5 mm i obecność krwawienia podczas badania sondą), w oparciu o najnowsze kryteria klasyfikacji AAP, w 2017 r. do tego podwójnie zaślepionego, randomizowanego badania klinicznego z rozdzielonymi ustami i okresem obserwacji trwającym 6 miesięcy zrekrutowano 21 osób. Badanie przeprowadzono w okresie od stycznia 2018 r. do kwietnia 2019 r., a pacjenci zgłaszali się do ambulatoryjnego oddziału periodontologii Instytutu Nauk Stomatologicznych w Bhubaneswar w Indiach. Badanie zaprojektowano zgodnie z zasadami Deklaracji Helsińskiej z 1975 r., zmienionej w 2008 r. Uzyskano zgodę etyczną od Instytucjonalnej Komisji Etycznej Uniwersytetu Siksha O Anusandhan. Przed rozpoczęciem badania wszyscy pacjenci zostali szczegółowo poinformowani o protokole, korzyściach z badania i związanym z nim ryzyku, a także o procedurach leczenia i uzyskali świadomą pisemną zgodę.

Pacjenci zgłaszający się z dwoma przeciwległymi miejscami o głębokości sondowania ≥ 5 mm, związanymi z zębami przedtrzonowymi i trzonowymi, bez zajęcia furkacji, wskaźnikiem pełnej płytki nazębnej w jamie ustnej < 1,5 22, bez chorób ogólnoustrojowych lub wyniszczających, lub stosujących jakiekolwiek leki, które mogłyby wpływać na uwzględniono wyniki leczenia periodontologicznego, bez historii leczenia periodontologicznego w ciągu ostatnich 6 miesięcy. Z badania wykluczono kobiety w ciąży i karmiące piersią, palaczki palące >10 papierosów dziennie oraz osoby z chorobami krwi lub liczbą płytek krwi poniżej 50 000 komórek/µl.

Randomizacja, zaślepianie i alokacja
Wszystkich pacjentów poddano randomizacji miejsc testowych (PRGF + SRP) i kontrolnych (sam SRP) przy użyciu losowej sekwencji generowanej komputerowo. Miejsce testowe otrzymało pojedynczą dokieszeniową aplikację PRGF po dokładnym SRP, podczas gdy miejsce kontrolne otrzymało sam SRP. Badanie to zaprojektowano jako randomizowane badanie kliniczne z podwójnie ślepą próbą, w którym zarówno badacz, jak i osoba oceniająca byli zaślepieni. Przydział protokołu leczenia dla pacjenta w odpowiedniej grupie został spisany w zapieczętowanej kopercie i został otwarty po podaniu SRP wszystkim pacjentom. Pojedynczy klinicysta (SP) przeprowadził SRP u wszystkich pacjentów. Przeprowadzono pojedynczą sesję SRP przy użyciu skalera ultradźwiękowego (skaler Acteon Satelac P5 Booster, Acteon, Niemcy, UE) przez cały okres obserwacji wynoszący 6 miesięcy.

Przygotowanie i dostawa PRGF
PRGF przygotowano zgodnie z poniższym protokołem.18 Od każdego pacjenta pobrano dziewięć mililitrów krwi do pojemników próżniowych zawierających 10% cytrynian trisodu. Pojemniki próżniowe odwirowano (Wirówka BTI-Endoret System IV, Instytut Biotechnologii, Vitoria, Hiszpania) w celu rozdzielenia krwi na 3 warstwy: czerwone krwinki (RBC), osad na dnie probówki; PRGF w środku probówki, tuż nad warstwą kożuszka leukocytarnego; oraz osocze ubogie w czynniki wzrostu (PPGF) na górze probówki (Rysunek 1). Górną frakcję zawierającą PPGF oznaczono jako frakcję 1 (F1), a część środkową oznaczono jako frakcję 2 (F2). Z każdej probówki zebrano F2 (PRGF) za pomocą pipety.18 F2 aktywowano 0,2 ml 10% chlorku wapnia i przeniesiono do strzykawki o pojemności 5 ml, aby utworzyć żel PRGF F2. Następnie żel PRGF F2 wytłoczono przez tępą kaniulę do głębszych kieszeni miejsc testowych. Opóźnienie między przygotowaniem żelu PRGF a podaniem do kieszeni ustalono na 5 do 10 minut. Sam ośrodek grupy testowej otrzymał żel PRGF F2 od niezależnego badacza (A.P).

Zmienne wynikowe
Pierwszorzędową miarą wyniku była redukcja głębokości sondowania (PD), a drugorzędną miarą wyniku były względny poziom przywiązania (RAL) i wskaźnik krwawienia bruzdy (SBI).23 Do pomiarów wyjściowych i kontrolnych RAL i PD używano sondy periodontologicznej UNC-15 (Hu -Friedy Mfg. Inc, Chicago, IL, USA). Wszystkie zapisy pomiarów wyników wykonano na początku badania, po 3 i 6 miesiącach. Punktem odniesienia do rejestracji RAL było oznaczenie wykonane na dolnej krawędzi stentu zgryzowego umieszczonego na badanym zębie. Wszystkie pomiary początkowe i kontrolne zostały wykonane przez niezależnego badacza (RM), który nie był świadomy miejsca, w którym zastosowano leczenie testowe.

Podano instrukcje higieny jamy ustnej po SRP i wzmocniono je we wszystkich punktach czasowych obserwacji. Przez cały okres badania nie przepisywano żadnych antybiotyków ani środków przeciwdrobnoustrojowych.

Analiza statystyczna
Do analizy zebranych danych wykorzystano program statystyczny SPSS wersja 20 (SPSS, Chicago, USA). Do analizy statystycznej wykorzystano jedno miejsce w obszarze doświadczalnym (powierzchnia) i jedno miejsce w obszarze kontrolnym (powierzchnia) z najgłębszą głębokością kieszeni i RAL na linii podstawowej. Dane wyrażono jako średnie ± odchylenia standardowe (SD). Aby osiągnąć moc 80% przy poziomie ufności 95% i wykryć średnie różnice w PD i RAL wynoszące 1 mm pomiędzy ośrodkami testowymi i kontrolnymi, konieczne było utworzenie 21 ośrodków na grupę. Aby uwzględnić możliwe straty w trakcie obserwacji, wzięto pod uwagę 25 ośrodków na grupę. Do analizy różnic wewnątrz i między grupami pod kątem wyników w różnych punktach czasowych wykorzystano test t dla par. Do porównania oceny głębokości sondowania pomiędzy grupami SRP + PRGF i SRP zastosowano test McNemara. W celu sprawdzenia normalności rozkładu przeprowadzono omnibusowy test normalności D’Agostino i Pearsona. Poziom istotności przyjęto na poziomie p < 0,05.

Wyniki

Do badania wybrano dwudziestu sześciu pacjentów z dwiema kieszonkami po przeciwnej stronie > 5 mm. U wszystkich pacjentów wskaźnik płytki nazębnej był akceptowalny po SRP i utrzymywał się przez cały okres badania. Nie zgłoszono żadnych powikłań w miejscach stosowania żelu PRGF. Badanie rozpoczęło się z udziałem 26 pacjentów (52 ośrodki), ale na koniec 6-miesięcznej wizyty kontrolnej można było ocenić jedynie 22 pacjentów (44 ośrodki). Szczegóły dotyczące rejestracji, przydziału i analizy pacjenta opisano na schemacie CONSORT (Rysunek 2). Czterech pacjentów nie mogło ukończyć całego okresu badania i nie stawiło się na wizytę kontrolną ze względów osobistych, jednakże dane wszystkich pacjentów zostały zapisane na pośredniej 3-miesięcznej wizycie kontrolnej.

Dyskusja

W tym randomizowanym badaniu klinicznym z rozdzielonymi ustami oceniano zastosowanie PRGF jako dodatku do SRP w leczeniu głębokich kieszonek przyzębnych. Według naszej najlepszej wiedzy jest to pierwsze badanie oceniające wpływ PRGF umieszczonego w głębokich kieszonkach przyzębnych. Wyniki niniejszego badania wykazały znaczną poprawę wszystkich zmiennych wynikowych przy zastosowaniu PRGF jako dodatku do SRP w porównaniu z samym SRP w leczeniu głębokich kieszonek przyzębnych.

„Endogenna medycyna regeneracyjna” to nowa koncepcja, która wykorzystuje osocze własnej krwi pacjenta oraz biologicznie aktywne czynniki wzrostu i cytokiny pochodzące z płytek krwi w celu stymulacji szybszego gojenia ran oraz regeneracji tkanek miękkich i twardych. Zastosowanie PRP, PRGF i fibryny bogatopłytkowej (PRF) zyskuje popularność w ostatnich dwóch dekadach w nauce o regeneracji. Stosowanie tych koncentratów płytek krwi jest dobrze udokumentowane w różnych scenariuszach klinicznych. Jednak zastosowanie koncentratów płytek krwi w kieszonkach przyzębnych w celu gojenia przyzębia jest bardzo słabo zbadane i niejasne.

Wcześniej przeprowadzono niewiele badań dotyczących aplikacji PRP do kieszonek przyzębnych. W naszym badaniu stwierdziliśmy znacznie większy przyrost przywiązania w ośrodkach z SRP+PRGF (3,41 ± 1,22 mm) w porównaniu z ośrodkami kontrolnymi (2,50 ± 1,19 mm) (p < 0,001), co było zgodne z badaniem, które wykazało znaczną poprawę kliniczną ze średnim przyrostem CAL wynoszącym 2,40 ± 0,4 mm dla miejsc kontrolnych i 2,68 ± 0,5 mm dla miejsc leczonych PRP jako uzupełnienie SRP po 6 miesiącach leczenia przewlekłego zapalenia przyzębia.14 PRGF w porównaniu z PRP ma dodatkową zaletę: mający konsystencję żelową, którą można łatwo wprowadzić do głębokich kieszonek przyzębnych i utrzymywać się w ograniczonym obszarze kieszonek. Żelowa konsystencja gwarantuje również powolne uwalnianie czynników wzrostu, wspomagając początkowe tworzenie tkanki ziarninowej i nabłonek.24

Wiadomo, że PRGF zmniejsza stan zapalny po 28 dniach i przyspiesza nabłonek ran w jamie ustnej. Analiza histologiczna w badaniu oceniającym całkowity nabłonek i redukcję stanu zapalnego ran po 7 i 28 dniach stosowania PRGF wykazała, że ​​rany opatrzone PRGF uległy całkowitemu nabłonkowi i wykazywały znaczną redukcję stanu zapalnego pod koniec 28 dni po zabiegu. -wyżej w porównaniu do ośrodków kontrolnych.25

Zastosowanie PRGF w gojeniu kieszonek przyzębnych można przypisać jego regeneracyjnemu działaniu na proliferację ludzkich fibroblastów dziąseł (HGF). W badaniu in vitro oceniano wpływ PRGF na proliferację i żywotność ludzkich fibroblastów dziąsłowych w porównaniu z PRF i wykazano znacznie silniejszy efekt stymulujący PRGF na proliferację i utrzymanie żywotności komórek do 72 godzin (p < 0,001), wywołując statystycznie znacząca (p < 0,001) proliferacja komórek HGF w porównaniu z kontrolą ujemną (100% żywotności) po 24, 48 i 72 godzinach.26 W innym badaniu zmniejszoną ekspresję genów keratyny 1 i keratyny 10 zaobserwowano w ludzkich keratynocytach poddanych działaniu PRGF, ale ta sama indukowana ekspresja genu transglutaminazy-1 wraz z ekspresją inwolukryny w sposób zależny od receptora naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR). Ta typowa ekspresja genu jest konieczna do regulacji końcowego różnicowania pierwotnych ludzkich keratynocytów.27 Zaobserwowano również, że PRGF stymuluje proliferację i migrację pierwotnych keratynocytów i fibroblastów spojówki w procesie gojenia ran na powierzchni oka.28 Zgodnie z wyżej wymienionymi badaniami, aktywowane płytki krwi koncentraty indukuje także proliferację ostatecznie zróżnicowanych ludzkich osteoblastów i fibroblastów skóry, niezbędnych do regeneracji tkanek miękkich i twardych.29

Wiadomo również, że PRGF zmniejsza działanie prozapalne, ponieważ protokół przygotowania PRGF zapewnia wykluczenie leukocytów z treści. Zarówno erytrocyty, jak i leukocyty zostały w procesie przygotowania niemal całkowicie wyeliminowane, a płytki krwi uległy znacznej, 2,84-krotnej koncentracji.30

Aktywność przeciwdrobnoustrojową PRGF wykazano poprzez jego działanie przeciwko czterem szczepom gronkowców, osiągając maksimum w ciągu pierwszych kilku godzin po aplikacji.31 Niewiele badań wykazało przeciwdrobnoustrojowe działanie czystego osocza bogatopłytkowego (P-PRP) przeciwko Enterococcus faecalis, Candida albicans, Streptococcus agalactiae, Streptococcus Oralis i Pseudomonas aeruginosa wykazały, że P-PRP hamuje wzrost wszystkich 3 szczepów, ale nie Pseudomonas aeruginosa.32,33 Zgodnie z wynikami niniejszego badania, niedawne badanie również wykazało kliniczne działanie przeciwzapalne PRP poprzez podanie PRP do kieszonek przyzębnych na głębokość większą niż 4 mm po SRP. Wszystkie kliniczne parametry przyzębia wykazały zmniejszenie wartości po 1 miesiącu stosowania PRP wraz z zauważalnym zmniejszeniem liczby limfocytów.34

Liczna literatura wskazuje na potencjał regeneracyjny autologicznych koncentratów płytek krwi w chirurgicznym leczeniu zapalenia przyzębia w połączeniu ze skalingiem i planowaniem korzenia lub innymi biomateriałami.35,36,37,38,39 W takich zabiegach chirurgicznych stosuje się fibrynę bogatopłytkową i osocze bogatopłytkowe. podejścia regeneracyjne.40 Dokieszeniowe podanie PRF i PRP wydaje się trudne ze względu na brak możliwości ich wprowadzenia i zatrzymania odpowiednio w małych, zamkniętych przestrzeniach kieszonkowych. Jednakże PRGF ze względu na swoją żelową konsystencję wydaje się idealny do niechirurgicznych zastosowań wewnątrzkieszeniowych.

W naszym badaniu zaobserwowano zachęcające wyniki po jednorazowym podaniu PRGF do kieszeni. Proponujemy, aby wielokrotne zastosowania PRGF miały dodatkową wartość i można je było badać w różnych populacjach. Zastosowanie PRGF do kieszonek przyzębnych jest łatwe, bezpieczne i daje zachęcające wyniki i może pomóc pacjentom, u których chirurgiczne leczenie przyzębia może być niewykonalne. W dalszych badaniach można będzie również ocenić działanie przeciwdrobnoustrojowe PRGF na różne periodontopatogeny w głębszych kieszonkach przyzębnych oraz wpływ na różne biomarkery zapalne GCF.

Wniosek

Wprowadzenie technologii PRGF otworzyło nowe perspektywy w leczeniu przyzębia i stanowi znaczący postęp w nauce o regeneracji, ponieważ wspomaga gojenie tkanek przyzębia. W ramach badania stwierdzono, że zastosowanie technologii PRGF w niechirurgicznej terapii przyzębia poprzez proste podanie do kieszonki żelu PRGF do głębokich kieszonek przyzębnych jako uzupełnienie SRP u pacjentów z zapaleniem przyzębia okazało się skuteczne w zmniejszaniu głębokości kieszonek i przyrostu na poziomie załącznika. Aby ustalić nasze ustalenia, należy przeprowadzić dalsze badania na większej próbie i ocenić parametry biochemiczne i mikrobiologiczne.

Źródła:

• ¹Bartold PM, Cantley MD, Haynes DR. Mechanisms and control of pathologic bone loss in periodontitis. Periodontol 2000. 2010 Jun;53(1):55-69. https://doi.org/10.1111/j.1600-0757.2010.00347.x
  » https://doi.org/10.1111/j.1600-0757.2010.00347.x
• ²Graves DT, Li J, Cochran DL. Inflammation and uncoupling as mechanisms of periodontal bone loss. J Dent Res. 2011 Feb;90(2):143-53. https://doi.org/10.1177/0022034510385236
  » https://doi.org/10.1177/0022034510385236
• ³Lindhe J, Westfelt E, Nyman S, Socransky SS, Haffajee AD. Long-term effect of surgical/non-surgical treatment of periodontal disease. J Clin Periodontol. 1984 Aug;11(7):448-58. https://doi.org/10.1111/j.1600-051X.1984.tb01344.x
  » https://doi.org/10.1111/j.1600-051X.1984.tb01344.x
• ⁴Heitz-Mayfield LJ, Trombelli L, Heitz F, Needleman I, Moles D. A systematic review of the effect of surgical debridement vs non-surgical debridement for the treatment of chronic periodontitis. J Clin Periodontol. 2002;29(s3 Suppl 3):92-102. https://doi.org/10.1034/j.1600-051X.29.s3.5.x
  » https://doi.org/10.1034/j.1600-051X.29.s3.5.x
• ⁵Caffesse RG, Sweeney PL, Smith BA. Scaling and root planing with and without periodontal flap surgery. J Clin Periodontol. 1986 Mar;13(3):205-10. https://doi.org/10.1111/j.1600-051X.1986.tb01461.x
  » https://doi.org/10.1111/j.1600-051X.1986.tb01461.x
• ⁶Bhansali RS. Non-surgical periodontal therapy: an update on current evidence. World J Stomatol. 2014 Nov;3(4):38-51. https://doi.org/10.5321/wjs.v3.i4.38
  » https://doi.org/10.5321/wjs.v3.i4.38
• ⁷Howell TH, Martuscelli G, Oringer J. Polypeptide growth factors for periodontal regeneration. Curr Opin Periodontol. 1996;3:149-56.
• ⁸Szulc M, Zakrzewska A, Zborowski J. Local drug delivery in periodontitis treatment: A review of contemporary literature. Dent Med Probl. 2018 Jul-Sep;55(3):333-42. https://doi.org/10.17219/dmp/94890
  » https://doi.org/10.17219/dmp/94890
• ⁹Gartenmann SJ, Weydlich YV, Steppacher SL, Heumann C, Attin T, Schmidlin PR. The effect of green tea as an adjunct to scaling and root planing in non-surgical periodontitis therapy: a systematic review. Clin Oral Investig. 2019 Jan;23(1):1-20. https://doi.org/10.1007/s00784-018-2684-7
  » https://doi.org/10.1007/s00784-018-2684-7
• ¹⁰Di Genio M, Barone A, Ramaglia L, Sbordone L. [Periodontal regeneration: the use of polypeptide growth factors]. Minerva Stomatol. 1994 Oct;43(10):437-43. Italian.
• ¹¹Kaur S, Sharma R, Sarangal V, Kaur N, Prashar P. Evaluation of anti-inflammatory effects of systemically administered curcumin, lycopene and piperine as an adjunct to scaling and root planing: A clinical study. Ayu. 2017 Jul-Dec;38(3-4):117-21. https://doi.org/10.4103/ayu.AYU_63_17
  » https://doi.org/10.4103/ayu.AYU_63_17
• ¹²Piemontese M, Aspriello SD, Rubini C, Ferrante L, Procaccini M. Treatment of periodontal intrabony defects with demineralized freeze-dried bone allograft in combination with platelet-rich plasma: a comparative clinical trial. J Periodontol. 2008 May;79(5):802-10. https://doi.org/10.1902/jop.2008.070436
  » https://doi.org/10.1902/jop.2008.070436
• ¹³Hanna R, Trejo PM, Weltman RL. Treatment of intrabony defects with bovine-derived xenograft alone and in combination with platelet-rich plasma: a randomized clinical trial. J Periodontol. 2004 Dec;75(12):1668-77. https://doi.org/10.1902/jop.2004.75.12.1668
  » https://doi.org/10.1902/jop.2004.75.12.1668
• ¹⁴Agarwal A, Dev Gupta N. Platelet-rich plasma with scaling and root planing: a double blind split-mouth randomized study. J Periodontol Implant Dent. 2014 Dec;6(2):35-9. https://doi.org/10.15171/jpid.2014.007
  » https://doi.org/10.15171/jpid.2014.007
• ¹⁵Panda S, Karanxha L, Goker F, Satpathy A, Taschieri S, Francetti L, et al. Autologous platelet concentrates in treatment of furcation defects-a systematic review and meta-analysis. Int J Mol Sci. 2019 Mar;20(6):E1347. https://doi.org/10.3390/ijms20061347
  » https://doi.org/10.3390/ijms20061347
• ¹⁶Panda S, Doraiswamy J, Malaiappan S, Varghese SS, Del Fabbro M. Additive effect of autologous platelet concentrates in treatment of intrabony defects: a systematic review and meta-analysis. J Investig Clin Dent. 2016 Feb;7(1):13-26. https://doi.org/10.1111/jicd.12117
  » https://doi.org/10.1111/jicd.12117
• ¹⁷Del Fabbro M, Karanxha L, Panda S, Bucchi C, Nadathur Doraiswamy J, Sankari M, et al. Autologous platelet concentrates for treating periodontal infrabony defects. Cochrane Database Syst Rev. 2018;11:CD011423. https://doi.org/10.1002/14651858.CD011423.pub2
  » https://doi.org/10.1002/14651858.CD011423.pub2
• ¹⁸Anitua E, Murias-Freijo A, Alkhraisat MH, Orive G. Clinical, radiographical, and histological outcomes of plasma rich in growth factors in extraction socket: a randomized controlled clinical trial. Clin Oral Investig. 2015 Apr;19(3):589-600. https://doi.org/10.1007/s00784-014-1278-2
  » https://doi.org/10.1007/s00784-014-1278-2
• ¹⁹Anitua E. Plasma rich in growth factors: preliminary results of use in the preparation of future sites for implants. Int J Oral Maxillofac Implants. 1999 Jul-Aug;14(4):529-35.
• ²⁰Anitua E, Sánchez M, Orive G. Potential of endogenous regenerative technology for in situ regenerative medicine. Adv Drug Deliv Rev. 2010 Jun;62(7-8):741-52. https://doi.org/10.1016/j.addr.2010.01.001
  » https://doi.org/10.1016/j.addr.2010.01.001
• ²¹Caton JG, Armitage G, Berglundh T, Chapple IL, Jepsen S, Kornman KS, et al. A new classification scheme for periodontal and peri-implant diseases and conditions – Introduction and key changes from the 1999 classification. J Clin Periodontol. 2018 Jun;45 Suppl 20:S1-8. https://doi.org/10.1111/jcpe.12935
  » https://doi.org/10.1111/jcpe.12935
• ²²Silness J, Loe H. PERIODONTAL DISEASE IN PREGNANCY. II. CORRELATION BETWEEN ORAL HYGIENE AND PERIODONTAL CONDTION. Acta Odontol Scand. 1964 Feb;22(1):121-35. https://doi.org/10.3109/00016356408993968
  » https://doi.org/10.3109/00016356408993968
• ²³Mühlemann HR, Son S. Gingival sulcus bleeding: a leading symptom in initial gingivitis. Helv Odontol Acta. 1971 Oct;15(2):107-13.
• ²⁴Moradi O., Ghamsari SM., Dehghan MM., Sedaghat R., Akbarein H. Effects of platelet rich plasma (PRP) and platelet rich growth factor (PRGF ®) on the wound healing of distal part of limbs in horses. Iran J Vet Surg. 2013;8(1);Serial 18.
• ²⁵López-Jornet P, Camacho-Alonso F, Molina-Miñano F, Vicente-Ortega V. Effects of plasma rich in growth factors on wound healing of the tongue. Experimental study on rabbits. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 2009 Sep;14(9):e425-8.
• ²⁶Vahabi S, Vaziri S, Torshabi M, Rezaei Esfahrood Z. Effects of Plasma Rich in Growth Factors and Platelet-Rich Fibrin on Proliferation and Viability of Human Gingival Fibroblasts. J Dent (Tehran). 2015 Jul;12(7):504-12.
• ²⁷Bayer A, Tohidnezhad M, Lammel J, Lippross S, Behrendt P, Klüter T, et al. Platelet-Released Growth Factors Induce Differentiation of Primary Keratinocytes. Mediators Inflamm. 2017;2017:5671615. https://doi.org/10.1155/2017/5671615
  » https://doi.org/10.1155/2017/5671615
• ²⁸Anitua E, Sanchez M, Merayo-Lloves J, De la Fuente M, Muruzabal F, Orive G. Plasma rich in growth factors (PRGF-Endoret) stimulates proliferation and migration of primary keratocytes and conjunctival fibroblasts and inhibits and reverts TGF-beta1-Induced myodifferentiation. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2011 Aug;52(9):6066-73. https://doi.org/10.1167/iovs.11-7302
  » https://doi.org/10.1167/iovs.11-7302
• ²⁹Brini AT, Ceci C, Taschieri S, Niada S, Lolato A, Giannasi C, et al. Effect of an Activated Platelet Concentrate on Differentiated Cells Involved in Tissue Healing. J Craniofac Surg. 2016 May;27(3):656-61. https://doi.org/10.1097/SCS.0000000000002540
  » https://doi.org/10.1097/SCS.0000000000002540
• ³⁰Nishiyama K, Okudera T, Watanabe T, Isobe K, Suzuki M, Masuki H, et al. Basic characteristics of plasma rich in growth factors (PRGF): blood cell components and biological effects. Clin Exp Dent Res. 2016 Mar;2(2):96-103. https://doi.org/10.1002/cre2.26
  » https://doi.org/10.1002/cre2.26
• ³¹Anitua E, Alonso R, Girbau C, Aguirre JJ, Muruzabal F, Orive G. Antibacterial effect of plasma rich in growth factors (PRGF®-Endoret®) against Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis strains. Clin Exp Dermatol. 2012 Aug;37(6):652-7. https://doi.org/10.1111/j.1365-2230.2011.04303.x
  » https://doi.org/10.1111/j.1365-2230.2011.04303.x
• ³²Drago L, Bortolin M, Vassena C, Taschieri S, Del Fabbro M. Antimicrobial activity of pure platelet-rich plasma against microorganisms isolated from oral cavity. BMC Microbiol. 2013 Feb;13(1):47. https://doi.org/10.1186/1471-2180-13-47
  » https://doi.org/10.1186/1471-2180-13-47
• ³³Drago L, Bortolin M, Vassena C, Romanò CL, Taschieri S, Del Fabbro M. Plasma components and platelet activation are essential for the antimicrobial properties of autologous platelet-rich plasma: an in vitro study. PLoS One. 2014 Sep;9(9):e107813. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0107813
  » https://doi.org/10.1371/journal.pone.0107813
• ³⁴Abdul Ameer LA, Raheem ZJ, Abdulrazaq SS, Ali BG, Nasser MM, Khairi AW. The anti-inflammatory effect of the platelet-rich plasma in the periodontal pocket. Eur J Dent. 2018 Oct-Dec;12(4):528-31. https://doi.org/10.4103/ejd.ejd_49_18
  » https://doi.org/10.4103/ejd.ejd_49_18
• ³⁵Panda S, Sankari M, Satpathy A, Jayakumar D, Mozzati M, Mortellaro C, et al. Adjunctive effect of autologus platelet-rich fibrin to barrier membrane in the treatment of periodontal intrabony defects. J Craniofac Surg. 2016 May;27(3):691-6. https://doi.org/10.1097/SCS.0000000000002524
  » https://doi.org/10.1097/SCS.0000000000002524
• ³⁶Panda S, Ramamoorthi S, Jayakumar ND, Sankari M, Varghese SS. Platelet rich fibrin and alloplast in the treatment of intrabony defect. J Pharm Bioallied Sci. 2014 Apr;6(2):127-31. https://doi.org/10.4103/0975-7406.129178
  » https://doi.org/10.4103/0975-7406.129178
• ³⁷Panda S, Jayakumar ND, Sankari M, Varghese SS, Kumar DS. Platelet rich fibrin and xenograft in treatment of intrabony defect. Contemp Clin Dent. 2014 Oct;5(4):550-4. https://doi.org/10.4103/0976-237X.142830
  » https://doi.org/10.4103/0976-237X.142830
• ³⁸Panda S, Del Fabbro M, Satpathy A, Das AC. Pedicled buccal fat pad graft for root coverage in severe gingival recession defect. J Indian Soc Periodontol. 2016 Mar-Apr;20(2):216-9. https://doi.org/10.4103/0972-124X.170844
  » https://doi.org/10.4103/0972-124X.170844
• ³⁹Del Fabbro M, Lolato A, Panda S, Corbella S, Satpathy A, Das AC, et al. Methodological quality assessment of systematic reviews on autologous platelet concentrates for the treatment of periodontal defects. J Evid Based Dent Pract. 2017 Sep;17(3):239-55. https://doi.org/10.1016/j.jebdp.2017.04.006
  » https://doi.org/10.1016/j.jebdp.2017.04.006
• ⁴⁰Sharma A, Pradeep AR. Treatment of 3-wall intrabony defects in patients with chronic periodontitis with autologous platelet-rich fibrin: a randomized controlled clinical trial. J Periodontol. 2011 Dec;82(12):1705-12. https://doi.org/10.1902/jop.2011.110075
  » https://doi.org/10.1902/jop.2011.110075